Germinar y Recoger Esporas

La germinación y recogida de esporas son pasos fundamentales en el cultivo de hongos. Se habla a menudo de cómo recoger y germinar esporas correctamente, y explico todos los detalles en este artículo.

Germinación

Nos centraremos en tres métodos principales:

1. Germinación en Cereales

Cereales como trigo, centeno o cebada esterilizados son el método más utilizado para la germinación directa de las esporas. El grain spawn es micelio cultivado en estos recipientes.

A continuación, enumero los pasos a grandes rasgos, pero si buscas más, ve al método detallado para cultivar hongos alucinógenos.

Proceso

  1. Preparación del Grain Spawn: Esteriliza los cereales en una autoclave o en una olla a presión de al menos 1 bar.
  2. Inoculación: Inyecta las esporas directamente en la bolsa de spawn en un ambiente estéril.
  3. Incubación: Mantén el grain spawn en condiciones controladas de temperatura y humedad hasta la aparición del micelio.
Ventajas
  • Facilita la inoculación sin necesidad de herramientas avanzadas.
Desventajas
  • No se puede “elegir” el dikaryon más fuerte.
  • Costo: con una jeringa se pueden hacer entre 5 y 10 inoculaciones.
  • Tiempo: El proceso de colonización puede requerir más tiempo.

2. Germinación en Agar

El agar es un medio de cultivo sólido utilizado para la germinación de esporas y el cultivo de micelio.

Si quieres entender mejor el proceso, ve al artículo sobre cómo preparo mis placas de agar.

Proceso

  1. Preparación del Agar: Prepara una placa de Petri con agar nutritivo esterilizado.
  2. Inoculación: Aplica las esporas sobre el agar en condiciones estériles con un hisopo estéril de esporas*.
  3. Colonización: Conserva la placa en un ambiente controlado hasta el crecimiento del micelio.

*el hisopo puede ser utilizado para recoger esporas directamente de las láminas del sombrero en un ambiente limpio, o de una impresión de esporas (impronta esporal). Explico todo en la sección de recogida de esporas en la segunda parte del artículo.

Ventajas
  • Permite el aislamiento de cepas específicas.
  • Útil para el análisis y la selección del micelio.
  • Flexible para cualquier uso.
Desventajas
  • Requiere técnicas de laboratorio y equipos específicos.

3. Cultivo Líquido

El cultivo líquido emplea una solución nutritiva líquida para un crecimiento acelerado del micelio a partir de esporas.

La receta detallada para preparar y usar cultivos líquidos está en un borrador que publicaré pronto.

Proceso

  1. Preparación de la Solución: Crea una solución nutritiva estéril (por ejemplo, con extracto de malta o miel).
  2. Inoculación: Introduce las esporas en la solución en un ambiente estéril.
  3. Incubación: Agita la solución regularmente para promover el crecimiento del micelio.

Nunca humedezcas la parte interna de la tapa de tu cultivo líquido al agitarlo para evitar contaminaciones. Para ayudarte a mezclar tu cultivo líquido todos los días, puedes poner una bola de vidrio en su interior antes de la esterilización, o usar un agitador magnético.

Ventajas
  • Tiempo: Rápida expansión del micelio.
  • Sencillez de reproducción: Fácil de usar para la inoculación de sustratos más grandes.
Desventajas
  • Contaminaciones: Alto riesgo de contaminaciones difíciles de ver.

La elección del método de germinación depende del objetivo del cultivo, los recursos disponibles y la experiencia del cultivador. Cada método tiene sus ventajas y desventajas.

Recogida de Esporas

1. Jeringa de Esporas

Una jeringa de esporas contiene esporas de hongos suspendidas en una solución acuosa. Es una herramienta popular entre los cultivadores por su facilidad de uso.

Cómo Hacer Una Jeringa de Esporas

La producción de jeringas de esporas estériles puede ser un proceso delicado que requiere precisión para evitar contaminaciones.

A continuación, encontrarás una guía paso a paso sobre cómo proceder.

Materiales Necesarios:

  • Esporas de hongos.
  • Jeringas estériles luer lock.
  • Alcohol isopropílico (70%) u otro desinfectante.
  • Guantes estériles.
  • Tubes de centrifugación (para la preparación de la solución de esporas).
  • Autoclave o olla a presión (para esterilizar).
  • Campana de flujo laminar o, en su defecto, una SAB.
  • Llama (quemador de gas, inducción o encendedor alcohólico) para la esterilización de las herramientas.

Opcional:

  • Placas de Petri (para germinar las esporas y confirmar la esterilidad).

Procedimiento:

1. Preparación y Esterilización del Material:
  • Coloca 25 ml de agua en un frasco y esterilízalo utilizando un autoclave o una olla a presión. El tiempo y la temperatura estándar para el autoclave son de 121°C durante 30 minutos.
  • Prepara una zona de trabajo limpia y estéril, preferiblemente con campana de flujo laminar. Si no está disponible, usa una SAB.
  • Usa guantes estériles y bien desinfectados con alcohol para reducir el riesgo de contaminación.
2. Preparación de la Solución de Esporas:
  • Recoge las esporas con un hisopo estéril.
  • Coloca las esporas en el tubo de centrifugación esterilizado que contiene agua estéril. Puedes “desprender” el algodón del hisopo o usar toda la punta de algodón del hisopo cortándola y ayudándote con unas pinzas de laboratorio.
  • Cierra y agita suavemente el frasco para dispersar uniformemente las esporas en el agua.
3. Llenado de las Jeringas:
  • Aspira la solución de esporas en el frasco con la jeringa.
  • Si es necesario, sella la apertura de la aguja con una tapa estéril para prevenir contaminaciones.
4. Verificación de la Esterilidad:
  • Antes de utilizar las jeringas de esporas para el cultivo, es importante verificar la esterilidad. Inocula una pequeña cantidad de la solución de esporas sobre agar agar o en un caldo nutritivo e incuba durante algunos días.
  • Revisa la presencia de crecimiento microbiano. La ausencia de crecimiento indica que la jeringa de esporas es estéril y está lista para su uso.
5. Conservación:
  • Conserva las jeringas de esporas en un lugar fresco y oscuro fuera del frigorífico hasta su uso. Algunas esporas pueden permanecer viables durante varios meses o incluso años si se conservan correctamente.

Cómo Utilizar las Jeringas de Esporas

Preparación: Asegúrate de trabajar en un ambiente estéril para evitar contaminaciones.

Inoculación: Inyecta suavemente la solución de esporas en el sustrato elegido.

Incubación: Conserva el sustrato en un lugar oscuro y húmedo hasta la germinación.

2. Hisopos de Esporas

¿Qué es un Hisopo de Esporas?

El hisopo de esporas es un método que utiliza un pequeño trozo de algodón u otro material absorbente para recoger las esporas directamente de los hongos.

Cómo Utilizar los Hisopos de Esporas

Recogida: Frota suavemente el hisopo sobre la superficie esporífera del hongo o impronta esporal.

Deposito: Transfiere las esporas del hisopo al sustrato.

Crecimiento: Mantén el sustrato en condiciones ideales para el crecimiento de los hongos.

3. Impresiones de Esporas

Una impresión de esporas se obtiene colocando un hongo boca abajo sobre una superficie como papel de aluminio, dejando que las esporas caigan y formen una impresión visible.

Creación de la Impresión

Deja el sombrero del hongo sobre un cuadrado de papel de aluminio durante unas horas, asegurándote de desinfectar el papel de aluminio con una llama.

Opcionalmente, puedes crear más de una impresión con el mismo hongo.

  • Coloca 4 cuadrados de papel de aluminio en una caja para alimentos con tapa.
  • Recoge un hongo fresco que haya roto la membrana hace pocas horas.
  • Corta el sombrero con tijeras o bisturí bien limpios.
  • Coloca el sombrero sobre el primer cuadrado de papel de aluminio y muévelo al siguiente cada dos horas.

Después de cada paso, puedes doblar por la mitad el papel de aluminio con la impresión de esporas y guardarlo en una de estas bolsas.

Cómo usar una impresión esporal en SAB o campana:

  1. Usa un objeto estéril para recoger las esporas de la impresión, como por ejemplo un hisopo* o un bisturí estéril.
  2. Distribuye sobre la petri, o haz una jeringa como se ha escrito anteriormente. En casos extremos, puedes raspar las esporas directamente en el sustrato.

*Los hisopos que he puesto en el enlace son perfectos en cuanto a tamaño, cantidad y tipo.

Profundizaciones

He creado una sección avanzada que habla sobre cómo gestionar diferentes fases del cultivo.

En esta sección encontrarás un artículo sobre la germinación y la recogida de esporas.

He descrito tres métodos principales de germinación: cereales, agar y cultivo líquido, cada uno con ventajas y desventajas específicas.

La germinación en cereales es el método más simple, seguido del uso de agar para el aislamiento de cepas y cultivo líquido para una reproducción rápida del micelio.

También encontrarás una sección dedicada a la recogida de esporas. Aquí se presentan tres métodos: jeringa de esporas, hisopos de esporas e impresiones de esporas.

También se proporciona un proceso detallado para la preparación de una jeringa de esporas estéril, incluidos los materiales necesarios y las precauciones a tomar para evitar contaminaciones.

Los hisopos de esporas y las impresiones de esporas se discuten como alternativas para recoger esporas directamente de los hongos.

Finalmente, se ofrecen instrucciones sobre cómo utilizar cada tipo de muestra de esporas para inocular sustratos y promover el crecimiento de los hongos.

Todo esto viene acompañado de sugerencias prácticas y consejos para garantizar el éxito en el cultivo de hongos alucinógenos.

PSILOCINA

Cómo cultivar hongos alucinógenos

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